栢晖有效磷检测方法(碱性土)
1.称取通过20目筛的风干样品5.000克于200毫升三角瓶中,加入0.5M碳酸氢钠溶液100毫升,再加适量无磷活性炭,塞紧瓶塞。
2.在振荡机上25℃振荡30分钟,3500r/min离心。立即用无磷滤纸过滤,滤液承接于 100mL三角瓶中,吸取滤液10mL(含磷量高时吸取 2.5~5.0mL,同时应补加0.5M碳酸氢钠浸提液至10mL)于150mL三角瓶
3.再用滴定管准确加入蒸馏水 35mL,然后移液管加入钼锑抗试5mL,摇匀,放置30min后。用880nm或700nm波长进行比色。以空白液的吸收值为0,读出待测液的吸收值(A)。
4.磷标准曲线绘制:分别取5μg/mL磷标准溶液0、1、2、3、4、5mL于150mL三角瓶中,再加入0.5M碳酸氢钠10mL,准确加水使各瓶的总体积达到45mL,摇匀;最后加入钼锑抗试剂5mL,混匀显色。同待测液一样进行比色,绘成标准曲线。最后溶液中磷的浓度分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL。
目前土壤有效磷是以化学测定为最常用的方法,其根据土壤性质不同和浸提剂不同,以Ols-en、Bray-Kurtzy、Mehich3、Morgan、Vermongt1、Vermongt2等方法作为测定土壤有效磷含量的常规方法。
Olsen法
1954年Olsen法被应用于土壤中有效磷测定。该方法特别适用于石灰性、弱酸性土壤的有效磷提取。由于石灰性土壤含有大量CaCO₃,如果用酸提取时,与CaCO₃发生反应,提取剂失去作用;同时由于CO₃²⁻的存在,在浸提过程中,引起溶液pH增加,CO₃²⁻生成HCO₃⁻有效磷,此时以Ca-CO₃形式存在钙盐活性降低,而一些活性较大的磷酸钙盐、磷酸铁铝盐发生水解而被浸提出来。而浸提液中的磷,通过钼锑抗比色法进行定量测定。Olsen法的优点在于它对速效的Fe-P、Ca-P和AI-P均可适当提取,使用性较广。其主要缺点:一是Olsen法所用浸提剂为pH8.5的弱碱性溶液,土壤中有机质在弱碱性条件下易被溶解出来,浸提液会呈现黄色或黄褐色,尤其土壤有机质含量高时,浸提液颜色更深,容易对比色分析造成干扰。通常浸提液可用活性炭脱色后再进行测定,可在一定程度上减小干扰;二是浸提液温度和显色温度对有效磷测定结果影响较大,进行测定时室温应控制在20-25℃。试验室主要通过控制温度,同时对这一问题已经开展了大量相关研究并提出经验校正式。目前,该方法广泛应用于我国西北地区宁夏、陕西、甘肃、新疆等以及东北三省,内蒙、河南、河北等省大部分土壤有效磷的测定。
Bray法
Bray法是盐酸-氟化铵提取-钼锑抗比色法,分为Brayl和Bray2,都用含氟的稀强酸溶液作为浸提液。在酸性条件下有效磷,各种Ca-P包括溶解度很低的部分Ca-P,在H⁺可作用下,被逐渐溶解。而Fˉ是一种金属络合物,可以与土壤中的的Al、Fe形成稳定的络离子,从而使结合在Al、Fe上的P游离出来进而被浸提出来。Bray2提取剂是同时提取吸附磷与酸溶磷的快速方法,但应用现在已很少,Bray1法操作简单,灵敏度高,同时受温度影响小。弱酸性到中性土壤有效磷可用Bray1法测定。我国包括四川黄壤,广西红壤,浙江丘陵红壤区以及中部沿海的棕灰性土壤、东北的黑土中土壤有效都可用Brayl法测定。
Mehlich3法
Mehlich3法是一种联合提取剂法,其提取剂可以提取N素以外的、P、K还有多种微量元素。该方法于1982年由Mehlich提出, Mehlich3浸提剂可广泛用于各类中性和酸性土壤,一定范围内碱性和石灰性土壤中多种元素的浸提;Mehli-ch3法所用浸提剂成分复杂,是一种联合浸提剂,因此土壤浸出液成分较复杂易带有颜色,如果浸提液中EDTA或NH4⁺浓度高时,均对比色测定有有影响,如果多种元素同时测定时,该方法优越性突出。
同位素示踪法
同位素示踪法,1954年由Russel1等人发展成为实验室测定土壤有效磷的方法,该方法利用放射性32P测定土壤有效磷,方法简单,同时很多研究表明该方法优于较化学提取测法,但是同位素标记化学品成本较高,不能在大量推广使用。
生物测定法
该方法选取对某种营养元素敏感的生物作为指示生物,用指示生物吸收营养元素的数量或者该生物相对生长量或生长状况作为土壤中该元素含量的指示。最早在1923年,Neubauer和Scheider用生物指示法测定了土壤磷、钾养分的含量,当时采用黑麦幼苗作为指示生物。Mitcherli-ch在1930年用燕麦的相对生长量来表示不同磷处理土壤中有效磷含量水平。以上两种方法,作为土壤有效磷含量生物测定的经典方法,为后来的许多学者沿用或者改进使用。
土壤有效磷测定方法趋势
随着科学技术的快速发展和进步,为土壤有效磷测试技术也有更多发展空间。 仪器设备的开发和应用.如流动注射分析仪、离子色谱仪、电感耦合等离子体光谱仪等,同时可测定多种元素。国外很多实验室,土壤测试发展成为多元素联合浸提、采用稀释加液器、风光光度计泵吸式进样、及自动进样等极大的提高工作效率,减少分析时间,降低分析成本
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